Olink™ Flex 彈性檢測方案


Cat. No. / ID: Olink Flex  

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Olink™ Proteomics為一種突破性的技術,在精準蛋白質體學研究中發揮重要功能,為多體學研究提供了新的選擇,高效準確的同時檢測多種重要生物標誌物,其核心為「Proximity Extension Assay (PEA)」技術,中文稱為「鄰近延伸分析技術」,結合了蛋白和抗體免疫反應與寡核苷酸擴增的兩種技術,大大地提升了偵測蛋白的靈敏度、專一性、實現高通量分析以及以超低檢體量去進行實驗,可用於疾病預測、診斷及預後,病例分層,基礎研究,生物標記物 (protein biomarker) 深入篩選,新藥靶點 (pQTLs) 等研究中,進而達成精準醫學的目標。

Olink™ Flex 屬於客製化套組,基於預設的約200個蛋白清單中挑選15-21個製成專屬套組,此預設的蛋白清單目前集中在發炎相關,同時也包含神經、心血管、腫瘤等蛋白標誌物,在此清單中挑選的蛋白質都可以無障礙的自由組合。

1. 高專一性: PEA 獨特設計,避免非特異性結合影響。
2. 覆蓋度廣: 可同時檢測 15 ~ 21 種蛋白。
3. 檢測範圍廣: 約 7 logs (fg - ng),同時檢測低/高表現蛋白質。
4. 樣本需求量少: 僅需 1μl 檢測體積。
5. 樣本類型多樣化: 血清/血漿、腦脊髓液、組織裂解液…等。
6. 嚴格的品質控制: 具 internal control,監控實驗品質。
7. 完整的效能驗證,在預設蛋白清單中可以無障礙的自由組合。

請先至Olink官網註冊「Olink Insight」帳號,網址: https://insight.olink.com/flex ,登入後請從既有的208個蛋白清單中挑選出 15~21個單白質,製成客製化套組,並輸出清單 (.csv) 提供給基米,經確認後,即進行客製化套組訂購與服務流程。

1. NPX數據品管
2. 樣品散佈圖
3. 蛋白質表現量分析
4. 蛋白質差異表現量分析 (T-Test / ANOVA)
5. 蛋白質生物功能富集分析 (ORA / GSEA)

NPX 是「Normalized Protein eXpression」的縮寫,也是 Olink 獨有的數據專有名詞,以 log2 為單位。它是根據 Ct 值或是 counts 執行數據標準化 (normalization) 流程後的格式。NPX 可以表示樣品內不同蛋白的表現量程度,然後利用這些數據進行特徵分析。高 NPX 值則代表高蛋白質濃度。因 NPX 採 log2 為單位計算,因此1 NPX 差異則代表 2 倍的濃度差異。

NPX定義:https://olink.com/faq/what-is-npx/

樣品類型 體積 (μl) 備註
Serum/Plasma 100 μl 1. 請聯絡負責業務詳談實驗內容
2. 樣本需使用Full Skirted 96-well PCR Plate運送,務必確認封膜有緊密黏合。
3. 樣本需進行隨機化排序。
4. 樣品數需以40個為單位。

※樣本隨機化說明請參考原廠官方資料 (連結: https://www.olink.com/faq/sample-randomization/)

1. 產出相對定量NPX數值和絕對定量濃度 (pg/mL)。
2. 物種限制人類。