全基因體甲基化定序


Cat. No. / ID: DNAM_Whole Genome Methylation Sequencing  

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表觀遺傳學是人類基因體研究中迅速發展的領域,DNA甲基化現象可調控轉錄,進而影響基因表達。目前已知許多人類疾病的生成皆與表觀遺傳修飾有密切的關係,如各種癌症、胚胎發育及神經學疾病等。有別於過去經常使用Bisulfite將基因體中未甲基化修飾的胞嘧啶C轉化為尿嘧啶U的Whole Genome Bisulfite Sequencing,基龍米克斯利用酵素法進行轉換,大大降低Bisulfite對於DNA造成的損傷。

基米特色:

  1. 全程 Made in Taiwan
  2. 採用 NEBNext Enzymatic Methyl-Seq 試劑進行建庫與定序
  3. 使用Enzymatic conversion取代傳統Bisulfite方法,避免DNA受到損傷 

Enzymatic Methylation Sequencing (EM-seq) 利用酵素法將DNA上的胞嘧啶 (C)轉換為尿嘧啶 (U),如果胞嘧啶(C)受到甲基化修飾,則不會受酵素影響。

相較於傳統化學法亞硫酸鹽反應(Bisulfite conversion),可能會造成DNA的損傷以及在GC content較高的區域容易出現GC bias,基米採用的酵素法能夠完美避免上述缺點。

  • 標準分析內容:
  1. 原始數據品管 (Reads Quality Filtering)
  2. 甲基化偵測 (Methylation level calling)
  3. 甲基化差異結果 (Differentially Methylation Result)
  4. 甲基化註解 (Methylation Annotation)
    -GO 富集分析
    -KEGG 富集分析
樣品類型 體積(μl) 總量(μg) 濃度(ng/μl) OD260/280 OD260/230
Genomic DNA ≥ 20  ≥ 0.5 ≥ 10  1.8 - 2.2 ≥ 2.0
  • 定序平台:NovaSeq, 150PE
  • 數據量: 深度建議 30X coverage